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任务描述
我要做的实验是看不同处理组的细胞中同一基因表达的变化情况，用相对定量的方法。我看到相对定量有两种：有参照基因的相对定量、不需参照基因的相对定量（△△Ct法）。
问题如下：
1：所谓参照基因是什么？是用于制定标准曲线的DNA么（比如自己构建的T载体质粒），是随便一个稳定纯净的模板都可以做参照基因，还是必须跟你的目的基因有关系？
2：上述两种方法前体是不是必须保证内参基因在不同处理情况下表达量一致？
3：为了确定内参基因可用（即表达量在不同处理时恒定），我分别取相同数目的对照组和实验组的细胞用于RNA提取，然后测定浓度并调整至RNA浓度相同，同样体系反转录后，real-time PCR测定内参的Ct值，基本一致，则可用。这种方法是否可行。
初次做定量，不懂的地方很多，望大家多多指教，谢谢啦
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