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您的位置: 首页 > 任务大厅 > 技术支持 > 精子RT-PCR问题
单人悬赏 精子RT-PCR问题
  • 雇主:jileliang
  • 截止时间:2015-11-03
  • 分类: 技术支持
  • 收藏:
已托管赏金:

10.00

  • 发布需求,托管赏金 2015.10.19
  • 威客投稿
  • 雇主选稿
  • 中标公示 2015.11.03
  • 验收付款 2015.11.03
  • 评价 2018.11.13

任务描述

最近做精子RT-PCR,精子提取方法是80%、40%Percoll密度梯度离心,SAGE1005洗涤精子离心,PBS低速离心洗两遍。提总RNA 用AxyPrep总RNA小量制备试剂盒,可是提完跑GAPDH内参Ct值老是在28左右,这和文献有很大出入啊啊。

想请教之前做过精子RT-PCR尤其是弱精子症患组的战友们,究竟有哪些要注意的要点呢?提取总RNA后续的实验步骤肯定是没问题的,主要是RNA提取的问题。

我的标本是处理后2小时左右才加 Buffer R-I裂解液,会不会是最主要的问题?或者有没有哪位老师能解答精子RNA体外降解的问题,我从文献中并没有找到这方面的说法。

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