精选iTRAQ定量蛋白质组学服务

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品牌: shquanmai 公司: 上海泉脉生物科技有限公司

提供商：	泉脉生物科技
服务名称：	iTRAQ定量蛋白质组学服务

技术原理
iTRAQ（isobaric tags for relative and absolute quantitation）技术是由美国AB Seiex公司研发的一种多肽体外标记技术。该技术采用多达8种稳定同位素标签，通过特异性标记多肽的氨基基团，然后进行串联质谱分析，可同时比较多达8种不同样品中蛋白质的相对含量。
1. iTRAQ试剂由三部分组成：1）报告基团（reporter group）相对分子质量分别为113、114、115、116、117、118、119和121 Da； 2）平衡基团（balance group）相对分子质量分别为192、191、190、189、187、186和184 Da； 3）反应基团（peptide reactive group）形成8种分子量为305 Da的等质量同位素标签。
2. iTRAQ试剂标记酶解后的肽段，可与氨基酸N端及侧链的一级胺发生反应。在一级谱图中，来自于不用样品的同一肽段，标记后，表现为相同的质荷比。
3. 在二级质谱中，报告基团、平衡基团和反应基团之间的键断裂，带不同同位素标签的同一肽段产生质量为113、114、115、116、117、118、119和121Da的报告离子，根据报告离子的丰度可获得样品间相同肽段的定量信息，再经过软件处理得到蛋白质的定量信息。

技术优势
1. iTRAQ标记技术可在一次实验同时对多达8个样本进行定量分析，降低了反复实验引入的技术误差，8个样品之间可进行任意两两比较，增加实验设计的灵活性。可用于多个时间点蛋白质组动态变化的监测；灵活增加实验重复/技术重复以及进行多个个体样本的研究。
2. 该技术为体外标记，可标记各种动物组织、植物组织、微生物、体液、细胞等样本。
3. 重复性好，灵敏度高，蛋白覆盖范围广，在单张谱图中同时进行定性与定量。
4. 标记完全，标记效率高达97%以上，等质量的同位素标签不增加样品的复杂程度。
5. 一次实验可定量2000种以上蛋白。

实验流程