应用领域-----评价实验细胞系的转染难易度不同细胞系的转染效率是千差万别的,如何鉴定目的细胞系是否适合转染是细胞转染实验的基本问题。通常需要采用荧光标记的siRNA或miRNA进行相应的转染对照试验,但该类转染对照不均匀地分布于细胞各处,有时甚至会粘连成团,很难定量细胞转染效率。而ribo
TRACER™是细胞核富集的核酸指示剂,通过与细胞核染料结合,即可精确定量分析细胞转染效率和细胞毒性。

图3使用ribo
MONITOR™检测ribo
Fect™CP转染siRNA于不同细胞系的转染效率
Cells transfected with riboTRACERTM Green (100nM) with riboFectTM CP (5 µl/well), fixed with PFA, stain with NUCLEOstainTM and DEADstainTM, 20X of microscope.-----评价转染试剂的转染效果与细胞毒性不同的转染试剂的转染效果差别很大。采用不适当的转染试剂进行转染实验时常发生转染效率不高的问题,甚至导致细胞大量死亡。ribo
MONITOR™通过荧光定量检测成功转染的细胞,死亡细胞,全部细胞,实现了细胞转染效率和细胞毒性的同时评估。
图4使用ribo
MONITOR™转染指示剂检测3种转染试剂转染293T细胞的转染效果
Reagent L的转染试剂细胞毒性较大,易引起细胞大量死亡,Reagent X转染试剂的转染效率不高。而ribo
FectTM CP的转染效率较高,几乎无细胞毒性,能够顺利转染293T细胞。
-----优化转染条件,监测转染效果转染试剂的用量和细胞密度是转染实验成功的关键,而保持转染实验转染效果批次间的稳定性,是实验可重复性的重要保证。ribo
MONITOR™通过结合细胞核染料,可快速检测出细胞的转染效率,优化最佳的转染试剂用量及细胞密度,确定最适宜的转染条件,以实现细胞的高效转染,减少实验中不必要的实验摸索。

图5采用ribo
MONITOR™转染指示剂优化Reagent L的试剂用量及转染时细胞密度
A-B:采用0.4µl和1µl的Reagent L转染Hela细胞的转染效果及细胞毒性检测;C-D:采用0.4µl和1µl的Reagent L分别进行4万和5万细胞的转染实验,结果表明采用1µl Reagent L,4万细胞进行转染时转染效率最高(C),细胞毒性最小(D)
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