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  • 天成用户

    提交于 2018-02-08 10:02:34

    一、多肽与载体蛋白交联
    对在动物体内发生免疫反响而言,大多数多肽的分子量都太小。将多肽与载体蛋白如KLH等交联以后,不仅能添加抗原的巨细,也能增强免疫性。咱们能够提供与KLH和BSA两种蛋白的交联。大多数客户挑选与KLH交联,由于KLH的免疫性非常好,而且BSA在许多试验中作为Blocking试剂,由于动物体内既会发生对多肽的抗体也会发生对载体蛋白的抗体,这么会呈现假阳性。
    二、抗体的运用
    由于抗体与许多生物分子,以蛋白和多肽等尤为明显,有很强的联系才能,抗体在生物医学研讨中占据共同的主要位置,在对蛋白的特性、含量的测定、散布状况的分析和蛋白的确证等方面都需要用到抗体。例如:确诊试剂盒如早孕试剂盒等,蛋白microalloy、immunohistochemistry 和普通的ELISA试验等。由于抗体有对特定分子很强的联系才能的特点,用抗体进行体内医治成了许多尽力的方向。成功的典范包含Genetech的Herceptin,用于医治一类特殊的乳腺癌和IDEC药业公司的Ritaxan,用于特定类型的Non-Hodgkin`s Lymphomas B-细胞。
    三、抗原和辨认区域
    大多数状况下,antigen和immunogen两个字是能够交换运用的,它们的差别是很小的。他们是别离指一个分子与免疫系统之间的两种类型的相互作用。一个immunogen是指能使一个生物组织的免疫系统发生免疫反响的分子,而一个antigen是指能与这种免疫反响的产品联系的分子,所以immunogen一定是antigen,但antigen纷歧定是immunogen,咱们这儿通用antigen,特指能与免疫反响的产品—抗体联系的分子。 辨认区域(epitopes)是指一个抗原分子中一个与抗体直接联系的一段特定的序列,关于任何抗原(抗原蛋白),很有可能有多个抗体辨认区域,对出产抗体而言,易于抗体辨认的部位的辨认区域最为理想。
    四、进行KLH交联的化学办法
    我们用MBS活化KLH,这么能将载体蛋白(KLH)上面的自在-SH与多肽末端的Cys的侧链-SH连接起来,这种办法直接,特异性高,而且安稳,一般挑选对免疫不主要的一端进行交联。 EDC活化载体上的-COOH,将载体的-COOH和多肽的-NH2连接起来也是一种可行的办法。但咱们只主张在多肽序列中有多个Cys时采用该办法。如果肽链中含有多个-COOH或-NH2基因,不主张运用该办法,由于会构成多重点交联的状况,使多肽构造受影响。常用载体蛋白除KLH外,还有BSA,Ovalbumin等,构成KLH的优势是它不搅扰ELISA或Western Blot等试验。
    五、对抗原多肽交联适宜的肽链长度
    一般主张10-15个残基进行交联。肽链越长,抗体辨认的区域越多,但也就越多时机构成安稳的二级构造。就不再是天然的方式了。太短的肽一般是没有用的,除非有足够的理由,如与有关宗族蛋白或别的蛋白有序列同源性等。
    六、KLH交联多肽溶液呈乳状的要素
    KLH是一个很大的而且聚合的蛋白。由于它的构造和巨细,它在水中的溶解度是很有限的,因而是乳状,这并不影响它的免疫性,这种混浊的溶液能够直接免疫动物。
    七、抗体的产值
    抗体的产值取决于许多要素:辨认区域的挑选,多肽的合成,载体的交联,免疫的操作步骤和动物的生理系统等等,因而抗体的产值是不等的。5-25mg都归于正常规模。

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    2018-02-08 10:02:34 提交于 2018-02-08 10:02:34

    一、多肽与载体蛋白交联
    对在动物体内发生免疫反响而言,大多数多肽的分子量都太小。将多肽与载体蛋白如KLH等交联以后,不仅能添加抗原的巨细,也能增强免疫性。咱们能够提供与KLH和BSA两种蛋白的交联。大多数客户挑选与KLH交联,由于KLH的免疫性非常好,而且BSA在许多试验中作为Blocking试剂,由于动物体内既会发生对多肽的抗体也会发生对载体蛋白的抗体,这么会呈现假阳性。
    二、抗体的运用
    由于抗体与许多生物分子,以蛋白和多肽等尤为明显,有很强的联系才能,抗体在生物医学研讨中占据共同的主要位置,在对蛋白的特性、含量的测定、散布状况的分析和蛋白的确证等方面都需要用到抗体。例如:确诊试剂盒如早孕试剂盒等,蛋白microalloy、immunohistochemistry 和普通的ELISA试验等。由于抗体有对特定分子很强的联系才能的特点,用抗体进行体内医治成了许多尽力的方向。成功的典范包含Genetech的Herceptin,用于医治一类特殊的乳腺癌和IDEC药业公司的Ritaxan,用于特定类型的Non-Hodgkin`s Lymphomas B-细胞。
    三、抗原和辨认区域
    大多数状况下,antigen和immunogen两个字是能够交换运用的,它们的差别是很小的。他们是别离指一个分子与免疫系统之间的两种类型的相互作用。一个immunogen是指能使一个生物组织的免疫系统发生免疫反响的分子,而一个antigen是指能与这种免疫反响的产品联系的分子,所以immunogen一定是antigen,但antigen纷歧定是immunogen,咱们这儿通用antigen,特指能与免疫反响的产品—抗体联系的分子。 辨认区域(epitopes)是指一个抗原分子中一个与抗体直接联系的一段特定的序列,关于任何抗原(抗原蛋白),很有可能有多个抗体辨认区域,对出产抗体而言,易于抗体辨认的部位的辨认区域最为理想。
    四、进行KLH交联的化学办法
    我们用MBS活化KLH,这么能将载体蛋白(KLH)上面的自在-SH与多肽末端的Cys的侧链-SH连接起来,这种办法直接,特异性高,而且安稳,一般挑选对免疫不主要的一端进行交联。 EDC活化载体上的-COOH,将载体的-COOH和多肽的-NH2连接起来也是一种可行的办法。但咱们只主张在多肽序列中有多个Cys时采用该办法。如果肽链中含有多个-COOH或-NH2基因,不主张运用该办法,由于会构成多重点交联的状况,使多肽构造受影响。常用载体蛋白除KLH外,还有BSA,Ovalbumin等,构成KLH的优势是它不搅扰ELISA或Western Blot等试验。
    五、对抗原多肽交联适宜的肽链长度
    一般主张10-15个残基进行交联。肽链越长,抗体辨认的区域越多,但也就越多时机构成安稳的二级构造。就不再是天然的方式了。太短的肽一般是没有用的,除非有足够的理由,如与有关宗族蛋白或别的蛋白有序列同源性等。
    六、KLH交联多肽溶液呈乳状的要素
    KLH是一个很大的而且聚合的蛋白。由于它的构造和巨细,它在水中的溶解度是很有限的,因而是乳状,这并不影响它的免疫性,这种混浊的溶液能够直接免疫动物。
    七、抗体的产值
    抗体的产值取决于许多要素:辨认区域的挑选,多肽的合成,载体的交联,免疫的操作步骤和动物的生理系统等等,因而抗体的产值是不等的。5-25mg都归于正常规模。