• 实名认证icon

    实名认证

  • 担保交易icon

    担保交易

  • 全额退款icon

    全额退款

您的位置:首页 > 问题中心 > 我要回答
  • 天成用户

    提交于 2018-01-21 22:01:26

    荧光绝对定量中标准品:指用含有目的基因的质粒,知道质粒的分子量和浓度计算出拷贝数,然后倍比稀释就作为绝对定量的标准品。
      获取:把目的基因p出来,然后接到质粒上,转染摇菌扩增,然后再抽质粒,酶切纯化。最后把纯化的目的基因做个鉴定。然后测定目的基因的量,计算出拷贝数。
      荧光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR,RTFQ PCR) 是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术,它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。
      PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;刚开始时, 探针结合在DNA任意一条单链上;PCR扩增时,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。

全部回答(3)
  • qjnamy

    2018-01-19 17:01:16 提交于 2018-01-19 17:01:16

    标准品一般情况下就是一直浓度的样品,不管是DNA也好,cDNA也好。一般就是整个实验室在做荧光定量时候都会使用这个样品。不过,要求不是很高,特别是在在相对定量的时候。在绝对定量是数据分析也有不同,毕竟还有标准曲线可以利用。
  • 本回答由科学教育分类达人 朱平推荐

    2018-01-21 22:01:26 提交于 2018-01-21 22:01:26

    荧光绝对定量中标准品:指用含有目的基因的质粒,知道质粒的分子量和浓度计算出拷贝数,然后倍比稀释就作为绝对定量的标准品。
      获取:把目的基因p出来,然后接到质粒上,转染摇菌扩增,然后再抽质粒,酶切纯化。最后把纯化的目的基因做个鉴定。然后测定目的基因的量,计算出拷贝数。
      荧光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR,RTFQ PCR) 是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术,它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。
      PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;刚开始时, 探针结合在DNA任意一条单链上;PCR扩增时,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
  • jinrongyu613

    2018-01-28 01:01:14 提交于 2018-01-28 01:01:14

    标准品指的是已知拷贝数的核酸,简单点说就是已知量的DNA。

    获取方法是通过一些仪器及方法测得DNA含量,换算成拷贝数,再进行梯度稀释,即可得到标准品