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制备电泳实验一连续电泳

发布时间:2018-11-15 10:34:02 阅读量:221次



仪器、耗材
实验步骤
1. 连续洗脱电泳

使用连续洗脱的聚丙烯酰胺凝胶电泳或琼脂糖电泳能制备微克到毫克级的多肽,蛋白或核酸。装置可以是各种各样的。有的是把样品直接加在固体凝胶的表面,分子经过电泳分离后,由流动的缓冲液洗脱,纯化后的分子被浓缩,并由蠕动泵和部分收集器收集。

2. 连续自由流动电泳

连续自由流动电泳是一种经典的用于分析的电泳,分辨率不高。现在较多的用于制备,如多通道流动电泳技术能在每小时处理几十毫克样品,并具有较高的活力。

3. 空间电泳

在地面实验中,对流和样品沉降是自由溶液电泳分离的两大限制因子。但在空间的微重力条件下,这两个因子可以被忽略,因而在空间使用连续自由流电泳可以得到高产量和高质量的分离纯化样品。

国际上对空间电泳的探索开始于 50 年代。1971 年,美国 Apollo-14 开始了第一次空间电泳实验,尽管没有成功,但在此基础上,70 年代末美国和西德在空间或空间实验室都成功地分离了细胞。1982 年苏联成功地使用 Ampholine ( 原瑞典 LKB 公司产品)等电聚焦电泳方法在空间分离了生物大分子和细胞。至今已有大量的有关文献报道,如美国 Hymer 等的报道,在空间的分离量可比地面高 500 倍,分辨率高 125 倍。