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细胞破碎和蛋白质溶解实验一(高速)珠磨法

发布时间:2018-11-15 10:33:59 阅读量:158次



实验方法原理 该法应视为研磨法的扩展。它用玻璃珠替代磨料。小量样品(湿重不超过 3 g)可在试管内进行,大量样品需使用特制的高速珠磨机。
实验材料
试剂、试剂盒
仪器、耗材
实验步骤

1. 0.1~3 g 湿重细胞混悬在等体积缓冲液内。容器建议选用结实的聚乙烯试管;


2. 每克湿重细胞加入 1~3 g 预冷的玻璃珠;


3. 用混旋搅拌器最大强度混旋 3~5 次,每次 1 min, 两次之间置冰上冷却 1 min。

注意事项

1. 本法最常用来破碎酵母。


2. 玻璃珠直径 500 um,用前如下处理:浓盐酸洗后,双蒸水洗至中性,烘干。用前预冷。


3. 混旋时易漏出,宜用有密封圈的螺旋盖关紧试管或用石蜡膜封好。

其他